庆大霉素注射超过12天以后再用，一般不会不起作用。
庆大霉素是一种氨基糖苷类抗生素，主要用于治疗细菌感染引起的疾病，如急性胃肠炎、慢性胃炎、痢疾等。庆大霉素注射一般需要使用2-3天，如果患者病情较轻，一般使用2天左右，病情可逐渐好转。如果患者病情较重，一般使用3天左右，病情可逐渐好转。如果患者病情较重，使用庆大霉素注射超过12天以后再用，一般不会出现明显的治疗效果，甚至可能出现病情加重的情况。因此，建议患者在医生指导下使用庆大霉素，避免自行盲目用药，以免引起不良反应，对身体造成伤害。
另外，患者在使用庆大霉素注射时，需要注意保持注射部位清洁卫生，以免引起感染的情况。同时，患者在饮食上还需要注意保持清淡饮食，可以适当食用小米粥、面条等食物，避免食用辣椒、花椒等辛辣刺激的食物。
