脑脊髓通常选择腰3-4或腰4-5椎间隙进行穿刺 。腰椎3-4或4-5间隙的腰椎穿刺不会触及脊髓,成功通过这两个缺口后,可以保留超过10毫升或数十毫升的脑脊液,用于脑脊液的常规、生化、细菌学和免疫检查。脑脊液通常每天能产生500毫升左右,因此留下一小部分脑脊液不会影响大脑或脊髓。